在醫(yī)學(xué)檢驗中,體內(nèi)多類激素水平及其微量代謝產(chǎn)物、藥物及代謝產(chǎn)物、維生素類及疾病相關(guān)抗原的分析測定總計可達幾十至上百種之多。但由于其檢測靈敏度要求較高,一般免疫技術(shù)難以達到。因此,長期以來一直使用放射免疫法。這不僅對操作人員的健康造成了危害,其廢棄物對環(huán)境也有嚴重的污染。因此需要特殊的防護及廢物處理系統(tǒng);同時,由于受到自然衰變的限制,其試劑不便長期儲存和運輸,因而大大地限制了它的發(fā)展。 x'@0]f.
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長期以來,人們大多采用光度計作為主要檢測儀器,其原理是通過光電轉(zhuǎn)換器件將光信號轉(zhuǎn)換為電信號,再加以放大。其主要特點是結(jié)構(gòu)簡單、性能穩(wěn)定;但靈敏度低、線性范圍窄。隨著現(xiàn)代量子物理學(xué)的發(fā)展以及人們對光的微觀特性認識的逐步深入,出現(xiàn)了一種被稱為單光子計數(shù)器的新型光電器件。這種光子計數(shù)儀的靈敏度及線性范圍均已超過常規(guī)檢測技術(shù)能達到的水平。它能在檢測不到任何光線存在,即所謂“全黑環(huán)境”中正常工作,最主要的是該方法具有無輻射,無須對廢液后續(xù)處理的投入。 '+N!3r{G
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光電倍增管的結(jié)構(gòu) q3adhY9|)0
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光電倍增管是一種真空器件。它由光電發(fā)射陰極(光陰極)和聚焦電極、電子倍增極及電子收集極(陽極)等組成。典型的光電倍增管按入射光接收方式可分為端窗式和側(cè)窗式兩種類型。圖1所示為端窗型光電倍增管的剖面結(jié)構(gòu)圖。其主要工作過程如下:當(dāng)光照射到光陰極時,光陰極向真空中激發(fā)出光電子。這些光電子按聚焦極電場進入倍增系統(tǒng),并通過進一步的二次發(fā)射得到的倍增放大。然后把放大后的電子用陽極收集作為信號輸出。因為采用了二次發(fā)射倍增系統(tǒng),所以光電倍增管在探測紫外、可見和近紅外區(qū)的輻射能量的光電探測器中,具有極高的靈敏度和極低的噪聲。另外,光電倍增管還具有響應(yīng)快速、成本低、陰極面積大等優(yōu)點。
vF0#] 圖1 端窗型光電增管的剖面結(jié)構(gòu)圖
82C54的基本功能
N|Xx#/ s3kHNDdC Intersil公司的定時/計數(shù)器82C54是8253的改進型,操作方式及引腳與8253完全相同。它的改進主要反映在82C54的計數(shù)頻率更高,可高達12MHz。片內(nèi)包含3個獨立的16位計數(shù)通道,每個計數(shù)通道有6種工作方式,可由程序設(shè)置和改變,所有的輸入/輸出電平信號都與TTL兼容。
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$DMVtE0 W'u6F-$2 光子計數(shù)儀的設(shè)計
"<H.F87Z) bO>q`%& 1 總體方案設(shè)計
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?o>Y NypM+y 基于儀器整體安裝及可維護性的考慮,儀器采用整體形式,包括對儀器的控制、鍵盤操作及顯示、儀器的傳動部分及光子檢測部分。采用96微孔板作為測量載體;為增強測量的定位準(zhǔn)確度和運行的平穩(wěn)性,光電檢測系統(tǒng)以固定方式檢測樣品,送樣機構(gòu)可按要求進行Y方向及X方向順序運動。采用可視性強的液晶顯示器,可顯示儀器當(dāng)前所處狀態(tài)及每孔測量結(jié)果。定義20種可選擇的測量時間,可對微孔板的任意行數(shù)定義測量;數(shù)據(jù)輸出采用外接打印機,原始數(shù)據(jù)可在主機獨立測量完畢后由打印機輸出。計算機控制測量可完全替代單機測量的功能,同時可在Windows的操作軟件包下進行樣品區(qū)、標(biāo)準(zhǔn)區(qū)、陰陽性孔位定義、測量及數(shù)據(jù)處理。
MWl?pG!Y #'fh'$5" 采用日產(chǎn)光電倍增管作為光子檢測裝置的核心部分。傳動系統(tǒng)采用齒杠、齒輪傳動與同步帶、齒輪傳動相結(jié)合的形式,送樣器(孔板托盤)、光電檢測裝置在開機后及測量完畢均定位在初始位置;送樣器及光電檢測裝置的傳動系統(tǒng)采取互相垂直的獨立運動機構(gòu)。計數(shù)儀采用MGL(S)24064帶背景光綠色顯示屏的顯示器,89C55單片機控制,82C54計數(shù),外接中文打印機,和單片機通過RS232通信。具體硬件電路如圖2所示。
qZACX.Hw 圖2 光子技術(shù)儀硬件電路
2 測量原理
-U~]Bugvh @H2c77% 該儀器的測量原理為單光子計數(shù)法。微弱光信號檢測一般以光電倍增管(PMT)為檢測器,在弱光下,光電倍增管的電流來源于光子碰撞光陰極產(chǎn)生的光電子發(fā)射,并經(jīng)倍增后在陽極形成電脈沖輸出。
rXc-V},az8 qPGpN0M` 光子檢測裝置的核心是光電倍增管,其各電極之間均加有規(guī)定值較高的直流電壓。當(dāng)光子打到光陰極時,由于光電效應(yīng)的作用,其表面可以產(chǎn)生能量微弱的游離電子,稱為光電子;該電子在直流高壓產(chǎn)生的電場作用下離開光陰極,同時被加速,再次打到打拿極上并產(chǎn)生出能量更大數(shù)量更多的光電子,就這樣經(jīng)過多個打拿極的反復(fù)放大,最后使陽極產(chǎn)生電脈沖信號,該信號經(jīng)前置放大器放大,在經(jīng)比較器去除噪聲信號,最后由分頻器換算出光子脈沖數(shù),如圖3所示。
ggtGecKm 圖3 單光子計數(shù)法原理圖
3 軟件設(shè)計
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