由上面的3個條件之前的因素不只這里提到的這些 Zce/&
需要追加: ~ ^*;#[<
7.Z軸位置不只不固定,被采集過程還有可能是一半在區(qū)域內(nèi)一半在區(qū)域外的 I8Q!`KJ
8.被照明目標(biāo)存在側(cè)向散射,而其側(cè)向散射是可能影響相臨細(xì)胞的 +MyXIWmD
9.其實細(xì)胞的發(fā)光不是4PI空間的均勻分布. Q|(G -
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他們確實會得到原來的3個技術(shù)要點但卻有所不同 DE!c+s_g4
1.分辨率一致; 8C8,Q\WV(~
2.區(qū)域是否200UM,首先要根據(jù)熒光顯微鏡觀察: A運動細(xì)胞統(tǒng)計間距,B運行速度,C排列方向(重點是同細(xì)胞每次開啟關(guān)閉流動之后排列方式變化) T&+y~c[au
區(qū)域內(nèi)無差別采集一致 \^x`GsVy
3.效率及靈敏度不是可用,是必須可用靈敏度的至少2倍以上(前提是假設(shè)細(xì)胞統(tǒng)計最小中心距>2倍細(xì)胞大小,如果2的顯微鏡觀測并非如此,靈敏倍率還要變化)..(原因是為了采集到準(zhǔn)確數(shù)據(jù),每個細(xì)胞等效時間需要拍照2次,從而去除非全細(xì)胞的失誤數(shù)據(jù)) S(PU"}vZy
而3的方式不是絕對的,還有一種采集方式是累積暴光最后分析,這種需要的靈敏度偏低,可以多次疊加暴光收集統(tǒng)計數(shù)據(jù)... &NH[b1NMr
當(dāng)然無論采用哪種,樣品階段都要以兼容為目的,連拍單細(xì)胞采集和累積暴光都可以做測試才行(已有機器抄襲例外,這里只討論沒有人做過此產(chǎn)品的情況下該如何進行) &n~v;M
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