| cyqdesign |
2019-09-10 22:59 |
京都大學開發(fā)出探測單細胞光學信號傳導途徑新方法
日本京都大學Michiyuki Matsuda團隊開發(fā)出在活體雙光子（2P）光遺傳學中，熒光共振能量轉移（FRET）輔助的黃素蛋白的光活化技術。相關論文2019年9月9日在線發(fā)表在《自然—方法學》上。 tqB6: p-%
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研究人員介紹，現(xiàn)有的光學二聚體以優(yōu)化信號傳導為途徑，但它們在體內的用途有限，部分原因是它們在2P激發(fā)下的低效活化。 Mw+
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為了克服這一問題，研究人員開發(fā)了FRET輔助光活化技術，或稱為FRAPA。在2P激發(fā)下，mTagBFP2有效地吸收能量并將能量轉移到CRY2的發(fā)色團�；诮Y構引導工程，開發(fā)了具有40％FRET效率的嵌合蛋白，并命名為2P激活的CRY2或2paCRY2。2paCRY2用于開發(fā)名為2paRAF的RAF1激活系統(tǒng)。在表達2paRAF的三維培養(yǎng)細胞中，細胞外信號調節(jié)激酶（ERK）在單細胞分辨率下通過2P激發(fā)被有效激活。在表達2paRAF的小鼠的表皮細胞中也完成了ERK的光激活。他們進一步開發(fā)了mTFP1融合的LOV結構域，其表現(xiàn)出對2P激發(fā)的有效響應�？偟膩碚f，F(xiàn)RAPA將為體內單細胞光學信號傳導途徑控制鋪平道路。 j ~+(#|
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