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2012-03-12 16:09 |
中科院在超高分辨顯微成像領(lǐng)域取得新成果
《美國國家科學(xué)院院刊》（PNAS）在線發(fā)表了中科院生物物理研究所徐濤課題組在超高分辨顯微成像領(lǐng)域的最新研究成果。 qC1U&b#MVx
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近年來，隨著新型熒光探針和成像方法的改進(jìn)，光學(xué)成像的分辨率得到了極大的改進(jìn)。但是與傳統(tǒng)的光不敏感熒光蛋白（比如GFP，RFP）領(lǐng)域相比較，可逆光轉(zhuǎn)化熒光蛋白RSFP的發(fā)展較為滯后，品種極其單一�，F(xiàn)有的發(fā)綠色熒光的RSFP僅僅有Dronpa家族的幾個(gè)蛋白和剛剛開發(fā)出來的rsEGFP。而Dronpa在進(jìn)行PALM/STROM成像時(shí)，單個(gè)分子所發(fā)出的光子數(shù)比較低，成像分辨率差。 Z-SwJtWk
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徐濤課題組通過一種光轉(zhuǎn)化熒光蛋白mEos2的隨機(jī)突變，獲得了一系列具有光開關(guān)功能的綠色熒光蛋白，命名為mGeos。這些熒光蛋白都可以被405 nm激光所激活，被488 nm激光關(guān)閉，并且可以反復(fù)開關(guān)多次。新型光開關(guān)熒光蛋白mGeos-M, C, L, S, F and E都具有非常良好的熒光亮度，最亮的mGeos-C的亮度相當(dāng)于EGFP的1.86倍（熒光蛋白亮度用消光系數(shù)和量子產(chǎn)率的乘積來表示）；mGeos-E同時(shí)具有光控開關(guān)和pH值敏感性，類似于熒光蛋白pHluorin。 'DzBp
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借助(F)PALM/STORM平臺，徐濤課題組還深入研究了新型熒光蛋白的單分子性質(zhì)。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，新型熒光蛋白mGeos-M擁有十分優(yōu)秀的單分子性質(zhì)，是目前已知的單分子釋放出的光子數(shù)最多的綠色熒光蛋白，其單分子的定位精度可以達(dá)到10 nm左右。(F)PALM/STORM成像發(fā)現(xiàn)，與傳統(tǒng)的熒光蛋白Dronpa相比，mGeos-M標(biāo)記的微絲效果更好。 zD2.Q%`IM
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該研究改善了現(xiàn)階段光開關(guān)熒光蛋白（RSFP）發(fā)展滯后、品種單一的問題。其中的mGeos-M因其具有十分優(yōu)秀的單分子特性，有望成為替代Dronpa的新一代超高分辨率顯微成像分子探針。 W&e'3gk
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